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哪種細胞培養基適合您?

發佈日期:2024-04-26

圖片來源:Technology Networks

    在進行生命科學實驗室研究時,科學家必須創造適當的條件來適應活細胞的生存或生長。 

細胞培養需要一定的環境條件。為了達到最佳生長和增殖,細胞需要:

  • 溫度控制
  • 適當的 pH 值和滲透壓
  • 細胞附著的基質
  • 某種類型的培養基
  • 保持穩定條件的培養箱
  • 本文將深入探討這些關鍵組成部分之一:細胞培養基。我們將解釋什麼是細胞培養基、其成分是什麼、不同類型以及選擇合適的細胞培養基時應注意的事項。 

 

什麼是細胞培養基?

    細胞培養基,也稱為生長培養基,是一個涵蓋性術語,涵蓋為支持人工環境中細胞生長而產生的任何凝膠或液體。

當科學家從活體中取出細胞、器官或組織時,他們必須將它們保存在適當的人工環境中。培養基在細胞培養技術中發揮不可或缺的作用,支持體外細胞研究。 

它是提供細胞培養物生存和增殖所需營養的培養基。生長培養基還提供正確的滲透壓和pH值。 

科學家在選擇合適的生長培養基時必須考慮其細胞類型。有多種不同類型的細胞培養基可容納來自哺乳動物、植物、昆蟲、細菌、酵母菌、病毒等的細胞。

 細胞培養基的選擇直接影響實驗結果,因此必須仔細考慮。 

 

細胞培養基的成分是什麼?

    細胞培養基由旨在支持細胞生長的化合物和營養素的組合組成。細胞培養基的常見成分包括:

  • 胺基酸 :每種細胞培養基都含有胺基酸混合物,胺基酸是蛋白質的組成部分必需胺基酸和非必需胺基酸均可用於促進細胞活力和生長。 
  • 維生素:維生素可促進細胞生長和增生。血清在含血清培養基中用作許多維生素的來源,但在無血清培養基中必須添加維生素。 
  • 碳水化合物:碳水化合物為活細胞提供能量來源。通常使用葡萄糖,但也可以使用其他碳水化合物,例如半乳糖、果糖或麥芽糖。 
  • 無機鹽:需要無機鹽來調節膜電位和滲透壓。
  • 基本元素與微量元素:細胞生長需要鐵、鉀、鎂和鋅等元素。 
  • 血清:血清含有生長因子和抑制劑、荷爾蒙、蛋白酶抑制劑、螯合劑、胺基酸、碳水化合物、脂質、維生素、微量元素、礦物質等細胞生長所需的物質。常用的是牛血清。 
  • 荷爾蒙:可能會添加某些荷爾蒙來影響細胞功能、生長和增殖。 
  • 緩衝系統:緩衝系統調節 pH 值。
  • 補充劑:有時會在細胞培養基中添加荷爾蒙、酵素抑制劑和微量元素等補充劑,以滿足細胞類型和研究目標。
  • 抗生素:將抗生素添加到細胞培養基中以抑制真菌和細菌的生長。由於蛋白質可以結合一些抗生素負載,因此抗生素最適合血清培養基。相反,無血清培養基中的細胞發生抗生素毒性的可能性較大。  

 

細胞培養基有哪些不同類型?

    細胞培養基可分為兩大類:天然培養基和合成培養基。

天然培養基

    天然培養基是源自組織萃取物或動物體液的培養基,例如血漿、淋巴液和血清。自然培養基可分為三類:

  • 生物體液:例子包括血清、血漿、淋巴和羊水。
  • 組織萃取物:例子包括胚胎、骨髓、腫瘤和肝臟萃取物。 
  • 凝塊或凝血劑:例子包括血漿凝塊和凝血劑。 

血清是最常見的天然培養基。血清甚至用做合成培養基培養物的補充劑。牛血清因其營養豐富、使用歷史長等優點而廣受歡迎。 

 

合成培養基

    合成培養基(也稱為人造培養基)是使用各種有機和無機化合物創建的介質。合成培養基包括:

  • 含血清培養基:使用補充血清的合成培養基。 
  • 無血清培養基:無血清培養基 (Serum free medium, SFM) 比含血清培養基具有更高的一致性,使研究人員能夠在不需要血清的情況下提供細胞生長和擴增。  
  • 化學成分確定的培養基:化學成分確定的培養基無使用動物來源的成分,僅由經純化過的有機成分和無機成分組成。 
  • 無蛋白培養基:無蛋白培養基不含蛋白質。根據需要添加蛋白質補充劑。  
  • 平衡鹽溶液 (BSS)BSS本身用於保持細胞存活。 BSS富含營養物質和其他化合物,可形成能支持細胞生長和增殖的培養基。因此,BSS構成了許多類型的複雜培養基的基礎。 

無血清培養基 (SFM) 通常分為基本/基礎或複雜兩類。基礎培養基是指沒有添加物的培養基。一旦將生長補充劑添加到基礎培養基中,它就變成了複雜的培養基。 

 

該如何尋找細胞培養基

    最重要的步驟是確定使用什麼類型的細胞培養基。可用的商業培養基如此之多​​,找到正確的選擇可能會令人生畏。

首先研究您將使用的細胞系,以確定建議哪些不同的培養基。然後,您可以選擇一些並嘗試一下,看看哪種最有效。以下是一些需要考慮的因素。 

 

1. 培養基準備 

    細胞培養基品種有 三種形式

  •  粉末培養基:粉末培養基最便宜,但必須由研究人員滅菌製備。     
  •  濃縮液:濃縮液只需研究者稀釋即可。
  •  完整(Ready-to-use)培養基:完整培養基是最簡單的培養基類型。它們的設計目的是讓研究人員無需多餘的操作即可使用。     

 

2. 使用的培養基種類:天然 vs合成

    所有細胞培養基:天然培養基或合成培養基。每種培養基都有自己的優點和缺點,引導研究人員選擇哪種培養基。

血清培養基是透過從血漿中去除血紅素來產生的。所得混合物含有對細胞生長和增殖有價值的成分組合。血清培養基的優點包括:

  • 含有多種細胞營養素,如胺基酸、維生素、礦物質和脂肪酸。
  • 提供允許細胞黏附的組件。
  • 含有多種生長因子和荷爾蒙。  

但血清培養基也有缺點。說到血清培養基的缺點:

  • 缺乏成分均勻性,使其不太適合大規模實驗 
  • 含有多種化合物的混合物,其中一些可能有害或抑制某些細胞類型的生長。
  • 與合成培養基相比,污染的風險更大
  • 可能會使細胞培養產品的分離變得複雜。 
  • 可能很貴。 

合成培養基具有高度一致性的明顯優勢。研究人員可以確保他們使用相同的培養基,即使在擴大研究規模時也是如此。此外,人工培養基通常比以血清為基礎的培養基便宜。

 

3. 使用哪種特定介質

     一旦您在自然培養基和人工培養基之間做出選擇,您就必須選擇特定的培養基。許多實驗室使用商業培養基,以最少的努力實現品質和一致性。

要找到最好的,您必須問自己:

  • 您將使用什麼類型的細胞,它們的要求是什麼?
  • 您的實驗室的能力和限制是什麼? 
  • 實驗的目的是什麼? 

例如,幹細胞需要能夠促進維持、分化、擴增和下游應用的培養基。由於幹細胞具有多能性,因此必須密切監測其培養基條件,以免研究人員最終得到目標以外的東西。有些商業培養基專為與幹細胞一起使用而設計。

如果您不確定哪種培養基最好,培養基公司可以幫助您縮小選擇範圍。確保您了解您的細胞、目標和實驗室規格,以便選擇最合適的。 

 

原文連結:https://www.technologynetworks.com/cell-science/articles/which-cell-culture-media-is-right-for-you-331552

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